1,發(fā)酵現(xiàn)象演示實(shí)驗(yàn)需要什么儀器與材料
雖然我很聰明,但這么說(shuō)真的難到我了
發(fā)酵罐啊。。。這是必須的。實(shí)驗(yàn)室可以用專門的小罐。原料方面就看你要什么產(chǎn)物了。如果周期短一點(diǎn),就去制谷氨酸什么的,三十個(gè)小時(shí)左右的樣子吧。如果周期不介意長(zhǎng)一點(diǎn)就可以制酒啦。僅僅是發(fā)酵過(guò)程的話原料不需要像工業(yè)生產(chǎn)那樣從頭開始,完全可以用中間物開始。省掉一些步驟。
2,發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)原理
發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)原理是進(jìn)行液體發(fā)酵。生產(chǎn)上使用的發(fā)酵罐容積大,均用鋼板或不銹鋼板制成。供實(shí)驗(yàn)室使用的小型發(fā)酵罐,其容積可從約1升至數(shù)百升或大些。10升以下是用耐壓玻璃制作罐體,10升以上用不銹鋼板或鋼板制作罐體。發(fā)酵罐配備有控制器和各種電極,能自動(dòng)地調(diào)控試驗(yàn)所需要的培養(yǎng)條件,是微生物學(xué)、發(fā)酵工程、醫(yī)藥工業(yè)等科學(xué)研究所必需的設(shè)備。
3,實(shí)驗(yàn)室用的小型發(fā)酵罐多少錢
這個(gè)要考慮到你的需求和你的預(yù)算,不知道你所需要的是多大體積的罐子,實(shí)驗(yàn)室如果小試的話,也存在從5L到50L的大小,所以最好還是確定型號(hào)。如果是在學(xué)校實(shí)驗(yàn)室或者研究所的話,可以考慮用進(jìn)口的一些發(fā)酵罐,比如美國(guó)NBS的罐子,無(wú)論從性能和穩(wěn)定性來(lái)說(shuō),基本上都是不錯(cuò)的選擇,缺點(diǎn)就是價(jià)格偏高,10L的罐子,差不多價(jià)格在20w以上。如果是工廠在做一些小試的話,可以考慮用國(guó)產(chǎn)的,無(wú)論是玻璃罐子或者不銹鋼罐子,價(jià)格都不會(huì)很高,價(jià)格在10w以內(nèi)。
4,乳酸菌 搖床
不好意思,我不是搞發(fā)酵的,只是實(shí)驗(yàn)室有人研究發(fā)酵才略懂一二的,我們實(shí)驗(yàn)室是用小發(fā)酵罐(1L好像是)模擬培養(yǎng),是要富集發(fā)酵產(chǎn)物的,可以隨時(shí)調(diào)節(jié)pH。要是用搖床應(yīng)該是不流動(dòng)的,就是營(yíng)養(yǎng)不會(huì)得到補(bǔ)充,我個(gè)人認(rèn)為最好還是用生產(chǎn)類似的發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)比較靠近生產(chǎn)的數(shù)值。
搖床培養(yǎng)是要加入空氣吧,乳酸菌據(jù)我所知應(yīng)該是兼性厭氧的比較多,所以有空氣的話應(yīng)該不會(huì)影響生長(zhǎng),好像還會(huì)長(zhǎng)的更好,如果你想得到的產(chǎn)物是菌體的話就還好,要是想要得到發(fā)酵副產(chǎn)物的話就應(yīng)該采取厭氧,可以充氮?dú)鈸u床培養(yǎng)。
5,空氣總過(guò)濾器和分過(guò)濾器如何滅菌
總過(guò)濾器滅菌時(shí),一定要保證蒸汽的壓力,使用壓力一定要在0.3~0.4 MPa之間,滅菌過(guò)程中過(guò)濾器的表壓應(yīng)在0.15~0.20 MPa左右。中小型過(guò)濾器一般保壓45~60 min,總過(guò)濾器(一級(jí)過(guò)濾器)保壓時(shí)間為1.5~2 h。對(duì)于新裝介質(zhì)的過(guò)濾器,滅菌時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)一些,一般延長(zhǎng)15~20 min。滅菌后要用壓縮空氣將介質(zhì)吹干,吹干時(shí)間可根據(jù)介質(zhì)的吸水性質(zhì)和過(guò)濾器的規(guī)模而定。玻璃纖維吹干時(shí)間略短,棉花介質(zhì)稍長(zhǎng),中小型過(guò)濾器吹干時(shí)間在1~2 h,大型過(guò)濾器可達(dá)2~4 h。用壓縮空氣吹時(shí),氣流要適當(dāng),太小吹不干,過(guò)大容易將介質(zhì)頂翻,造成空氣走短路而帶菌。
6,求助幫忙設(shè)計(jì)一個(gè)小型的發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
我們公司專門做試驗(yàn)用的小型發(fā)酵裝置。上月曾給北京中關(guān)村二村科學(xué)工程研究所做了一套小型的試驗(yàn)裝置。大體思路就是使發(fā)酵料在一個(gè)人為設(shè)定的環(huán)境中進(jìn)行發(fā)酵。本裝置要求不銹鋼材質(zhì),最好達(dá)到自動(dòng)化控制這樣對(duì)溫度和濕度的控制更為精確。另外發(fā)酵不可能是單一一種物質(zhì)發(fā)酵,所以發(fā)酵罐入口擁有類似于絞龍的裝置把發(fā)酵料攪拌均勻。加熱可以采取小型電加熱帶,纏在發(fā)酵罐外部用晶閘管進(jìn)行溫控。補(bǔ)水就很容易解決了你不妨多想想。
你好!hehe`~超市買酵母粉,然后你用水和點(diǎn)面。放在溫度較高的地方,冬天的話比如暖氣這些半天就可以了。這個(gè)就是最簡(jiǎn)單的發(fā)酵試驗(yàn)了。北方人的蒸饅頭,對(duì)于面都要發(fā)酵一下的。如有疑問(wèn),請(qǐng)追問(wèn)。
7,實(shí)驗(yàn)室5L通氣機(jī)械攪拌發(fā)酵罐的實(shí)罐滅菌流程
你的發(fā)酵罐是用什么樣的滅菌方法?蒸汽原位滅菌(有蒸汽發(fā)生器)?不是的話,直接把罐放到滅菌鍋里去滅!下面是蒸汽原位滅菌的流程: 滅菌要進(jìn)行空消和實(shí)消兩步??障窃谕读锨?,對(duì)氣路、料路、種子罐、發(fā)酵罐用蒸汽進(jìn)行滅菌,消除所有死角的雜菌,保證系統(tǒng)處于無(wú)菌狀態(tài)。實(shí)消是當(dāng)罐內(nèi)加入培養(yǎng)基后,用蒸汽對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的過(guò)程,種子罐和發(fā)酵罐實(shí)消的操作過(guò)程相同。 空消過(guò)程中,維持蒸汽溫度121℃左右,先開排污水閥和進(jìn)氣閥,排空夾套水,在對(duì)管路、濾器和種子罐發(fā)酵罐滅菌,空消時(shí)間大約為30到40分鐘,當(dāng)設(shè)備初次使用或者長(zhǎng)期不用的情況下,最好采用間歇滅菌的方法,間歇滅菌指第一次空消結(jié)束后,間隔3到5個(gè)小時(shí)再空消一次,以便殺死芽孢。除菌過(guò)濾器的濾芯不能承受高溫高壓,因此,蒸汽減壓閥必須調(diào)整在0.13Mpa,不得超過(guò)0.15MPa??障麜r(shí),應(yīng)將罐上的接種口、排氣閥及料路閥門微微打開,使蒸汽通過(guò)這些閥門排出,同時(shí)保持罐壓為0.13~0.15Mpa??障Y(jié)束后,應(yīng)將罐內(nèi)冷凝水排掉,并將排空閥門打開,防止冷卻后罐內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓、損壞設(shè)備??障麜r(shí),溶氧、PH 電極取出,可以延長(zhǎng)其使用壽命。 空消結(jié)束后,應(yīng)盡快將配好的培養(yǎng)基從加料口加入罐內(nèi),此時(shí)夾套內(nèi)應(yīng)無(wú)冷卻水。培養(yǎng)基在進(jìn)罐之前,應(yīng)先糊化,一般培養(yǎng)基的配方量以罐體全容積的70%左右計(jì)算(泡沫多的培養(yǎng)基為65% 左右,泡沫少的培養(yǎng)基可達(dá)75%~80%),考慮到冷凝水和接種量因素,加水量為罐體全容積的50% 左右,加水量的多少與培養(yǎng)基溫度和蒸汽壓力等因素有關(guān),需在實(shí)踐中摸索。先開啟機(jī)械攪拌裝置,使罐內(nèi)物料均勻混合,轉(zhuǎn)速50~100rpm。打開夾套蒸汽閥、排汽閥,對(duì)罐內(nèi)培養(yǎng)基預(yù)熱,當(dāng)罐內(nèi)溫度升到90℃時(shí),關(guān)閉夾套進(jìn)汽閥,打開罐內(nèi)所有進(jìn)汽閥,通入蒸汽。當(dāng)罐溫上升到105℃時(shí),緩緩打開排汽閥,將罐頂冷空氣排掉,持續(xù)五分鐘后,關(guān)閉排汽閥。當(dāng)罐壓升至0.12Mpa,溫度升到121~123℃時(shí),控制蒸汽閥門開度,保持罐壓不變,30 分鐘后停止供汽。打開冷卻水的進(jìn)排閥門,在夾套內(nèi)通水冷卻,當(dāng)罐內(nèi)壓力降至0.05Mpa 時(shí),微微開啟排氣閥和進(jìn)氣閥,進(jìn)行通氣攪拌,加速冷卻速度,并保持罐壓為0.05Mpa,直到罐溫降至接種溫度。
應(yīng)該是發(fā)酵條件的控制問(wèn)題。一般認(rèn)為,發(fā)酵罐越小,條件變化越劇烈,也越不容易控制。比如溫度、ph值、溶氧等,本身東西少,參數(shù)變化就快,就相當(dāng)于微生物的生長(zhǎng)環(huán)境總是處于變化之中,當(dāng)然就不利于發(fā)酵的進(jìn)行了。罐體越大,條件變化就越緩慢,控制起來(lái)也越容易。至少,像保持恒定的溫度和通風(fēng)量,就比小罐容易得多。對(duì)于微生物來(lái)說(shuō),生存環(huán)境是穩(wěn)定的,也有利于發(fā)酵的進(jìn)行。
8,急需小型發(fā)酵貫的試驗(yàn)報(bào)告一份有關(guān)生化指標(biāo)的
1.材料與方法: 1.1材料: 1,菌種:大腸桿菌 2,培養(yǎng)基:?種子培養(yǎng)基(葡萄糖5.0g,蛋白胨5.0g,酵母膏2.5g,牛肉膏5.0,水500ml,pH值7.0), ?發(fā)酵培養(yǎng)基(葡萄糖100g,蛋白胨50g,酵母膏25g,牛肉膏50g,氯化鈉25g,氯化銨25g,水5L,pH7.0, 3,試劑:泡敵,菲林試劑,0.1%的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液,40%氫氧化鈉?! ?,儀器設(shè)備:BIOTECH-7BGZ發(fā)酵罐一套,分光光度計(jì),旋轉(zhuǎn)式搖床,離心機(jī),烘箱等?! ?.2實(shí)驗(yàn)原理: 發(fā)酵罐是進(jìn)行液體發(fā)酵的專用設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室使用的小型發(fā)酵罐,其體積可從1L至數(shù)百升。一般5L一下是用耐壓玻璃制作罐體。發(fā)酵罐配備控制系統(tǒng),它主要是對(duì)發(fā)酵過(guò)程中的各種參數(shù)如溫度,PH,溶解氧,攪拌速度,空氣流量,補(bǔ)料,泡沫水平等進(jìn)行設(shè)定,顯示,記錄以及對(duì)這些參數(shù)進(jìn)行反饋調(diào)節(jié)控制。 大腸桿菌是遺傳工程過(guò)程中常用的受體菌。通過(guò)控制臺(tái)合適的培養(yǎng)條件,可使大腸桿菌迅速持續(xù)地生長(zhǎng),獲得所要求的高產(chǎn)培養(yǎng)物?! 榱肆私獍l(fā)酵過(guò)程中菌體的生長(zhǎng)及對(duì)培養(yǎng)基的利用情況,需要發(fā)酵過(guò)程中定時(shí)設(shè)定地取樣測(cè)定。包括對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鏡檢,測(cè)定不同時(shí)期發(fā)酵液的細(xì)菌濁度及殘留還原糖的變化?! ?.3實(shí)驗(yàn)流程: 培養(yǎng)24h 培養(yǎng)12h 菌種 斜面? 一級(jí)接種 二級(jí)接種 37℃ 37℃ (500ml搖瓶) 培養(yǎng)基 8~10h 發(fā)酵罐 管路準(zhǔn)備 實(shí)罐滅菌 發(fā)酵 放罐 37℃ 取樣 分析測(cè)定 1.4發(fā)酵罐剖面圖: 1.5實(shí)驗(yàn)具體步驟: 1.5.1菌種準(zhǔn)備 1,配制培養(yǎng)基 配制種子固體培養(yǎng)基100mL,分裝試管,0.1MPa滅菌20min,然后擺成斜面. 配制種子培養(yǎng)液600mL,分裝50mL于一個(gè)250mL三角瓶中(作一級(jí)種子瓶),余下550mL平均分裝于三個(gè)500mL三角瓶中(作二級(jí)種子用),同上滅菌. 2,接種與培養(yǎng) 上罐前兩天,從冰箱中取出菌種轉(zhuǎn)接斜面,37℃培養(yǎng)24h. 上罐前一天,由斜面菌種轉(zhuǎn)接一級(jí)種子瓶, 37℃振蕩培養(yǎng)12h,然后轉(zhuǎn)接二級(jí) 種子瓶, 37℃振蕩培養(yǎng)10h. 1.5.2上罐前的準(zhǔn)備及實(shí)罐滅菌 1,洗凈發(fā)酵罐及各聯(lián)接膠管 配制發(fā)酵培養(yǎng)基5.0L,置發(fā)酵罐內(nèi),加入幾滴泡敵. 校正pH電極和溶氧(DO)電極. 把電極插口,取樣管,補(bǔ)料口,消泡劑料瓶等固定,密封好后,開夾套出,進(jìn)水閥V2,W1,使夾套充滿水,用保護(hù)罩蓋住罐蓋及發(fā)酵罐,用傾倒螺釘鎖緊法蘭,開保護(hù)罩頂部排氣閥V4,啟動(dòng)蒸氣發(fā)生器,啟動(dòng)攪拌馬達(dá),調(diào)轉(zhuǎn)速300r/min,開啟冷凝水出水閥V1,開啟蒸氣閥門S1,進(jìn)行在位滅菌; 2,當(dāng)保護(hù)罩頂部閥門V4有蒸氣排出時(shí),2min后關(guān)閉閥門,當(dāng)罐溫接近滅菌溫度時(shí),微開閥V4適當(dāng)排氣,并調(diào)整蒸氣閥S1維持罐溫.保溫結(jié)束后,關(guān)蒸氣閥S1,全開冷凝水出水閥V1,開進(jìn)水閥W3,將溫度設(shè)定在37℃,切入自動(dòng).當(dāng)溫度降到100℃以下,緩緩開排氣閥V4,使保護(hù)罩頂壓力表指示為零,移去保護(hù)罩; 3,連接通氣管路,將進(jìn)氣過(guò)濾器K7口與控制臺(tái)左側(cè)空氣出口連通,開彈簧夾,接通空氣壓縮機(jī)電源 , 對(duì) 發(fā) 酵 罐 進(jìn) 行 通 氣 , 調(diào) 整 空 氣 流 量 3 ~5L/min.當(dāng)溫度達(dá)到37℃時(shí),將預(yù)先滅菌的pH電極,DO電極(75%酒精消毒,UV消毒)接入發(fā)酵罐,連接各電極導(dǎo)線; 4,將流加堿的管線與泵和罐體連接,通過(guò)面板操作開關(guān)選擇堿泵,打開手動(dòng)開關(guān),使膠管內(nèi)充滿液體,將輸出上限設(shè)在15%,下限設(shè)為"0",待一切準(zhǔn)備就緒,將"手動(dòng)"開關(guān)調(diào)節(jié)到"自動(dòng)"狀態(tài).設(shè)定攪拌轉(zhuǎn)速為300r/min,空氣流量2~3L/min, pH7.0, DO100%,系統(tǒng)進(jìn)入發(fā)酵狀態(tài). 1.5.3發(fā)酵操作 當(dāng)發(fā)酵罐內(nèi)溫度達(dá)到并維持在所需溫度后,進(jìn)行如下操作: 取樣:松開彈簧夾J2,用無(wú)菌空氣將取樣管殘液壓入發(fā)酵罐內(nèi),再夾緊J2,將出料管放入接料瓶,松開取樣管彈簧夾J3,發(fā)酵液被壓入接料瓶,開J2,J3排出取樣管內(nèi)殘料,夾緊J2,J3. 接種:將酒精棉置于接種口槽中,旋松接種口,點(diǎn)燃酒精棉,在火焰保護(hù)下,打開接種口,倒入二級(jí)種子,然后旋緊接種蓋,移去火焰圈.接種后立即進(jìn)行第一次取樣,用于測(cè)定細(xì)菌OD值. 1.5.4發(fā)酵過(guò)程中的管理 每小時(shí)記錄發(fā)酵過(guò)程溫度,pH,DO,通風(fēng),轉(zhuǎn)速的測(cè)定數(shù)值,并記錄操作情況.注意發(fā)酵罐運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常,檢查各控制參數(shù)是否在合適的范圍內(nèi),遇有故障及時(shí)排除.每小時(shí)取一次樣.每次取樣50mL.取樣時(shí),用量筒準(zhǔn)確取流出的培養(yǎng)液50mL, 對(duì)號(hào)倒入三角瓶中,封口,立即放入二樓冷庫(kù)中保存. 1.5.5發(fā)酵過(guò)程中各理化指標(biāo)的測(cè)定 取樣:樣品→振蕩均勻→取樣5mL→測(cè)OD值 ↓ 離心(3000rpm,10min) ↓ 上清液 吸光度:將分光光度計(jì)開機(jī),選用A600波長(zhǎng),預(yù)熱20min,用蒸餾水調(diào)節(jié)零點(diǎn),將對(duì)照樣倒入比色杯中,作為空白對(duì)照,并對(duì)不同樣液依次進(jìn)行測(cè)定,對(duì)濃度大的菌懸液用對(duì)照樣(未接種的培養(yǎng)基)適當(dāng)稀釋后測(cè)定,使其OD值在0.1~1.0之間,經(jīng)稀釋后測(cè)定的OD值要乘以稀釋倍數(shù),才是培養(yǎng)液實(shí)際的OD值. 1.5.6放罐 經(jīng)過(guò)發(fā)酵約10h后,菌量增長(zhǎng)(OD)值緩慢時(shí),便可放罐.排放液需經(jīng)滅菌處理才可進(jìn)入下水道. 1.5.7清洗 放罐后,將發(fā)酵罐清洗干凈,關(guān)閉所有電源.