伊紅美藍(lán)(伊紅美藍(lán)瓊脂)

1. 伊紅美藍(lán)

1. 伊紅美藍(lán)

伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基用以鑒別大腸桿菌和沙門氏菌。培養(yǎng)基中,伊紅與美藍(lán)為指示劑,做成的培養(yǎng)基呈淡紫色。大腸桿菌能分解培養(yǎng)基中的乳糖而產(chǎn)生酸,能使伊紅與美藍(lán)結(jié)合成黑色化合物,有時還帶有熒光,沙門氏菌不能分解乳糖,故菌落顏色與培養(yǎng)基相同,伊紅與美藍(lán)還有抑制革蘭氏陽性菌生長的作用。

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基主要通過乳糖發(fā)酵鑒別腸道致病菌,還能抑制革蘭氏陽性菌生長,發(fā)酵乳糖的細(xì)菌能使培養(yǎng)基變紅,這是因為細(xì)菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基的PH植變成酸性的。

不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌沒有顏色的變化。

用于腸道致病菌的分離培養(yǎng)

2. 伊紅美藍(lán)瓊脂

2. 伊紅美藍(lán)瓊脂

有幾個意思EMB,嵌入式系統(tǒng)簡稱。   EMB,伊紅美藍(lán)瓊脂平板。   EMB, 由巴西生產(chǎn)的系列支線飛機產(chǎn)品.   EMB,electromechanical brake,電子機械制動   EMB=ethambutol,乙胺丁醇

3. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基

EMB瓊脂培養(yǎng)基 EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無機鹽、0.04%的伊紅Y、0.0065%的美藍(lán)和供作試驗的糖。常用于食品、乳制品、水源和病源標(biāo)本中的革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑒別。

4. 伊紅美藍(lán)的作用

瑞特(Wright)染色法:為發(fā)觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),識別各種細(xì)胞及其異常變化,血涂片必須嘲行染色。血涂片的各種染色方法大多是羅氏染色法衍變來的。目前常用瑞特染色法。

(1)瑞特染料是由酸性染料伊紅和堿性染料亞甲藍(lán)組成有復(fù)合染料。亞甲藍(lán)為四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結(jié)構(gòu)。通常為氯鹽,即氯化美藍(lán)。美藍(lán)容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料。市售美藍(lán)中部分已被氧化為天青。伊紅通常為鈉鹽。即伊紅和伊混合后,產(chǎn)生一種憎液性膠體伊紅美藍(lán)中性沉淀,即瑞特染料。

(2)細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用,各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。因此,用本染料液染色后,在同一血片上,可以看到各種不同的色彩,例如血紅蛋白,嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。

(3)PH對細(xì)胞染色有影響。細(xì)胞各種成分均不蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增多,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負(fù)電荷增多,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理易與美藍(lán)或天青結(jié)合,染色偏藍(lán)。因此細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,以致識別困難,甚至造成錯誤。

5. 伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基

平板劃線法分離菌種實驗步驟

1、融化培養(yǎng)基將裝有伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基的三角瓶放入熱水浴中加熱至沸,直至充分融化。

2、倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右后,按無菌操作法倒平板(每皿約倒15ml),平置,待凝。 操作方法:右手持盛培養(yǎng)基的三角瓶置火焰旁邊,用右手手掌和小指將瓶塞輕輕地?fù)艹觯靠诒3謱χ鹧?;然后左手拿培養(yǎng)皿并將皿蓋在火焰附近打開一條稍大于瓶口的縫隙,迅速倒入培養(yǎng)基約15ml,加蓋后輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基均勻分布在培養(yǎng)皿底部,然后平置于桌面上,待凝后即為平板。

3、作分區(qū)標(biāo)志(操作熟練后此步驟可省略) 在皿底用記號劃分成4個不同面積的區(qū)域,使A

6. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌的原理

因為SS培養(yǎng)基中含有乳糖,大腸桿菌能分解乳糖產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變紅色。

大腸桿菌在SS培養(yǎng)基的特征,具體體現(xiàn)在以下幾個方面:

第一、大腸桿菌在SS培養(yǎng)基,其菌落的特征一般情況下菌落的形態(tài)為乳白色,而且表面較光滑,呈圓形的菌落,邊緣較為整齊。

第二、大腸桿菌為革蘭氏短桿菌,一般呈中等大小,周身有鞭毛能夠運動,無芽孢。

第三、大腸桿菌體染色后一般為紅色,單個存在,形態(tài)為短小的桿狀。

第四、大腸桿菌在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,表現(xiàn)為深紫黑色、濕潤光滑,帶有金屬光澤的圓形菌落。

7. 伊紅美藍(lán)鑒別大腸桿菌顏色變化

大腸桿菌是人和許多動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細(xì)菌,周身鞭毛,能運動,無芽孢。主要生活在大腸內(nèi)。

  1、大腸桿菌是細(xì)菌,屬于原核生物;具有由肽聚糖組成的細(xì)胞壁醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng),只含有核糖體簡單的細(xì)胞器,沒有細(xì)胞核有擬核;細(xì)胞質(zhì)中的質(zhì)粒常用作基因工程中的運載體。

  2.大腸桿菌的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。

  3.人體與大腸桿菌的關(guān)系:在不致病的情況下(正常狀況下),可認(rèn)為是互利共生(一般高中階段認(rèn)為是這種關(guān)系);在致病的情況下,可認(rèn)為是寄生。

  4.在培養(yǎng)基培養(yǎng)時無需添加生長因子,向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)遇大腸桿菌,菌落呈深紫色,并有金屬光澤,可鑒別大腸桿菌是否存在。

  5.大腸桿菌在生物技術(shù)中的應(yīng)用:大腸桿菌作為外源基因表達(dá)的宿主,遺傳背景清楚,技術(shù)操作簡單,培養(yǎng)條件簡單,大規(guī)模發(fā)酵經(jīng)濟,倍受遺傳工程專家的重視。目前大腸桿菌是應(yīng)用最廣泛,最成功的表達(dá)體系,常做高效表達(dá)的首選體系。

  6.大腸桿菌在生態(tài)系統(tǒng)中的地位,假如它生活在大腸內(nèi),屬于消費者,假如生活在體外則屬于分解者。

  7.它的基因組DNA為擬核中的一個環(huán)狀分子。同時可以有多個環(huán)狀質(zhì)粒DNA.

  8.大腸桿菌細(xì)胞的擬核有1個DNA分子,長度約為4 700 000個堿基對,在DNA分子上分布著大約4 400個基因,每個基因的平均長度約為1 000個堿基對。

8. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于

EMB培養(yǎng)基 EMB是伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。

其配方為:

成分:蛋白胨10g 乳糖 10g K2HPO4 2g 2%伊紅Y水溶液 20ml 0.5%美藍(lán)水溶液13ml pH 7.4

溶于1L水中,滅菌待用。

9. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌

鑒別、培養(yǎng)大腸桿菌可使用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基,菌落呈黑色或紫黑色有金屬光澤.微生物的營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機鹽等.細(xì)胞分裂素屬于植物激素. 大腸桿菌屬于原核生物的細(xì)菌,其培養(yǎng)基的基本成分有碳源、氮源水和無機鹽;細(xì)胞分裂素屬于植物激素,可以添加在植物組織培養(yǎng)時的MS培養(yǎng)基中,培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基不能添加細(xì)胞分裂素.

10. 伊紅美藍(lán)染色

HE染色也稱蘇木精-伊紅染色,是常規(guī)染色。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。 Wright stain 又稱“美藍(lán)伊紅染色法”。為檢查白細(xì)胞及瘧原蟲的常用染色法。

11. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基名詞解釋

EMB瓊脂培養(yǎng)基: EMB(Eosin Methylene Blue)agar伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無機鹽、0.04%的伊紅Y、0.0065%的美藍(lán)和供作試驗的糖。常用于食品、乳制品、水源和病源標(biāo)本中的革蘭氏陰性腸道菌的分離和鑒別。

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